本生闡述：ELISA方法如何檢測(cè)帶抗體的相關(guān)指標(biāo)

　　在運(yùn)用ELISA方法測(cè)定抗體方面，通常所用的方法稱為間接法，也是目前常用的方法，其原理：間接法首先用抗原包被于固相載體，這些包被的抗原必須是可溶性的，或者至少是極微小的顆粒，經(jīng)洗滌，加入含有被測(cè)抗體之標(biāo)本，再經(jīng)孵育洗滌后，加入酶標(biāo)記抗抗體，(對(duì)人的標(biāo)本來(lái)說(shuō)即加酶標(biāo)抗人球蛋白IgG、IgM)，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色，底物降解的量，即為欲測(cè)抗體的量，其結(jié)果可用目測(cè)或用分光光度計(jì)定量測(cè)定。

　　ELISA試劑盒操作步驟：

　　1. 將抗原按5μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)，100μl /孔，4℃過(guò)夜。

　　2. 次日PBS-T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。

　　3. 加2%BSA封閉室溫1h，200μl /孔。

　　4. 陽(yáng)性對(duì)照從10ug/ml，做倍必稀釋，待測(cè)血清從1：50做倍比稀釋，預(yù)試驗(yàn)后確定稀釋倍數(shù)及陽(yáng)性對(duì)照的起始濃度及稀釋數(shù)量(以可以做標(biāo)準(zhǔn)曲線為參數(shù))，室溫1h。

　　5. PBS-T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。

　　6. 加入1：3000(不同公司有不同的推薦稀釋度)PBS-T稀釋的HRP標(biāo)記的山羊抗人IgG，100μl /孔，室溫1h。

　　7. PBS-T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。

　　8. 顯色，100μl /孔，顏色變深后中止顯色，2M硫酸在BIO-RAD酶標(biāo)儀上讀數(shù)，可用ABTS，OPD，TMB等。

　　ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。