酶聯(lián)免疫ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋操作流程

　　ELISA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋操作流程 天津本生試劑盒

　　一、標(biāo)準(zhǔn)品溶解

　　離心處理?：將凍干標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心(6000-10000rpm，30秒)，使管壁殘留粉末沉至管底?

　　溶解操作?：按說明書加入指定體積的蒸餾水或樣本稀釋液，室溫靜置10-30分鐘溶解，避免立即吹打

　　混勻要求?：溶解后渦旋振蕩或輕柔吹打混勻，形成原液(如S7濃度2000 pg/mL)?

　　二、梯度稀釋方法

　　準(zhǔn)備離心管?：標(biāo)記8個1.5mL離心管(S0-S7)，S0管加入250μL樣本稀釋液作為空白對照?

　　倍比稀釋步驟?：

　　取250μL原液加入S6管，吹打混勻10次

　　從S6管轉(zhuǎn)移250μL至S5管，同法操作至S1管

　　最終濃度梯度：2000→1000→500→...→31.25 pg/mL?

　　三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

　　稀釋液選擇?：血清/血漿樣本需使用試劑盒配套稀釋液，避免基質(zhì)干擾

　　操作規(guī)范?：大比例稀釋(如200倍)建議分步進(jìn)行(先10倍再20倍)?

　　現(xiàn)配現(xiàn)用?：生物素標(biāo)記抗體等試劑需在臨用10分鐘內(nèi)配制?

　　四、常見問題處理

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線異常?：檢查稀釋過程是否混勻充分，避免氣泡殘留

　　OD值超范圍?：確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解，避免未溶解蛋白被槍頭帶走

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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